Antecedentes: Dieciséis pacientes con melanoma (1 estadio IIC, 8 estadio III y 7 estadio IV) fueron tratados en un estudio de fase I para evaluar la seguridad y las respuestas inmunes, con una vacuna (DC/Apo-Nec) compuesta por células dendríticas (CD) autólogas cargadas con una mezcla de líneas celulares de melanoma apoptóticas/necróticas (Apo-Nec). Métodos: Las células mononucleares de sangre periférica (CMSP) se obtuvieron mediante leucaféresis y las CD se generaron a partir de monocitos cultivados en presencia de GM-CSF e IL-4 en medio libre de suero. Las CD inmaduras (CDi) se cargaron con células Apo-Nec irradiadas con rayos gamma y se inyectaron por vía intradérmica sin adyuvante. Cohortes de cuatro pacientes recibieron cuatro vacunas con 5, 10, 15 o 20 x10^6 DC/Apo-Nec por vacuna, con dos semanas de intervalo. Resultados: La vacuna fue bien tolerada en todos los pacientes. La toxicidad de la vacuna fue leve y no se alcanzó la dosis limitante de toxicidad. Se encontró que el 42,3 ±13,7% de las CDi de los pacientes con melanoma fueron capaces de fagocitar células Apo-Nec, lo cual indujo la maduración de las CD, evidenciado por el aumento en la expresión de CD83, CD80, CD86, HLA clase I y II en comparación con las CDi. Además, después de la fagocitosis, se observó una reducción del 75,2 ±16% en la endocitosis de Dextrano-FITC en comparación con las CDi. CCR7 se reguló al alza tras la fagocitosis de Apo-Nec en las CD de todos los pacientes y, en consecuencia, las células DC/Apo-Nec in vitro fueron capaces de migrar hacia MIP-3 beta. La puntuación de hipersensibilidad retardada (DTH) aumentó significativamente en los pacientes después de la primera vacunación y disminuyó ligeramente con la cuarta vacuna (prueba de Mann-Whitney, p<0,05). Para la paciente #1 se detectó una reacción DTH positiva a sus propias células tumorales irradiadas. La presencia de linfocitos T CD8+ específicos contra los antígenos gp100 y Melan A/MART-1 se estudió mediante unión de tetrámeros en pacientes HLA-A*0201 (7/15 pacientes) antes y después de la vacunación. Dos pacientes que permanecen sin evidencia de enfermedad (NED) aumentaron sus linfocitos T específicos contra dichos antígenos después de la vacunación. No se detectaron respuestas humorales contra las células Apo-Nec. Con un seguimiento medio de 44,5 meses poscirugía, la paciente estadio IIC se encuentra NED, 7/8 pacientes estadio III se encuentran NED y 7/7 pacientes estadio IV han progresado. Conclusiones: Se concluye que la vacuna DC/Apo-Nec es bien tolerada, induce inmunidad específica contra antígenos de melanoma y en pacientes estadio III puede prolongar la supervivencia libre de enfermedad, brindando protección contra la recaída en un contexto adyuvante.
Buenos Aires, Buenos Aires F.D., Argentina